主动特异性免疫疗法治疗肿瘤

主动特异性免疫疗法治疗肿瘤

　　 以树突状细胞为基础，应用主动特异性免疫疗法治疗肿瘤，是近几年医学界研究人体树突状细胞领域最受关注的热点。随着越来越多的人类肿瘤特异性抗原被医生确认和发现，为应用肿瘤抗原致敏的树突状细胞回输机体而激发人体特异性抗肿瘤免疫应答奠定了基础。目前，应用肿瘤抗原体外致敏树突状细胞的方式有多种。例如，肿瘤细胞冻融物、基因工程肿瘤蛋白抗原或人工合成的肿瘤抗原多肽在体外冲击致敏树突状细胞；或将肿瘤抗原基因通过腺病毒、逆转录病毒载体等转入树突状细胞。人癌胚抗原重组痘苗病毒是以天坛株痘苗病毒761株为载体所构建的、表达人癌胚抗原的重组减毒疫苗。它已被证实，能在真核系统高效而准确地表达细胞膜糖蛋白人癌胚抗原。现在，我们在以下两个相关方面的认识已所进展：一是，肿瘤抗原基因，即人癌胚抗原DNA，通过减毒的痘苗病毒载体转入人体树突状细胞后，机体内的相关反应；二是，对人癌胚抗原重组痘苗病毒转染的树突状细胞在机体内所发挥的治疗作用，即其所激发的抗人癌胚抗原分泌性肿瘤免疫状态。　　在人体内，成熟的树突状细胞表现出4个主要特征：一是，细胞形状不规则，表面有许多树枝状突起；二是，细胞表面具有丰富的、有助于抗原提呈的分子，如高表达MHCⅠ、Ⅱ分子，共刺激分子B7-1、B7-2，细胞间粘附分子CD40、ICAM-1等；三是，在混合淋巴细胞反应中具有激活静止T细胞的能力；四是，具有向局部淋巴细胞，即T细胞区迁移的能力。　　我们的实验结果表明：人体外周血单核细胞在体外，经人重组粒-巨噬细胞集落刺激因子及人重组白细胞介素-4联合刺激后具有典型的树突状突起，细胞表面的MHCⅡ类分子、共刺激分子B7-2和细胞间粘附分子ICAM-1、CD40的表达明显上调。它们能在自体混合淋巴细胞反应中激发T细胞的增殖，其中，转染了人癌胚抗原重组痘苗病毒的树突状细胞对T细胞的激发作用最强。转染了人癌胚抗原重组痘苗病毒的树突状细胞，所激发的T细胞对自体肿瘤细胞的抑制作用比天坛株痘苗病毒761组T细胞及无病毒组T细胞明显增强；但是，这3个组的T细胞，对于不属于人癌胚抗原分泌性的肿瘤细胞SMMC-7721的抑制作用均较低，而且3组间无明显差别。这提示，转染了人癌胚抗原重组痘苗病毒的树突状细胞细胞表面能更好地提呈MHC分子-人癌胚抗原的抗原肽复合物，供T细胞识别，进而激活人癌胚抗原特异性T细胞。　　我们在实验中发现：与腺病毒和逆转录病毒相比，痘苗病毒具有高效的真核表达载体，而且其表达的外源性蛋白质可被有效糖基化而保持原有的特性点。基于以上实验结果我们与中山医科大学共同研制了人癌胚抗原重组痘苗病毒。它是以中国天坛株痘苗病毒761株为载体所构建的、表达人癌胚抗原的重组减毒疫苗。现已被证实，它能在真核系统高效而准确　　地表达细胞膜糖蛋白人癌胚抗原。在实验中，我们将肿瘤抗原基因人癌胚抗原DNA通过减毒的痘苗病毒载体转入树突状细胞内，其目的是使树突状细胞产生内源性、持续性表达人癌胚抗原多个肿瘤抗原表位，并通过MHCⅠ类分子得到充分提呈。我们的实验证明了：转染了人癌胚抗原-重组痘苗病毒的树突状细胞所激发的T细胞对人癌胚抗原分泌性肿瘤细胞具有特异性杀伤作用。　　尽管我们的实验已取得了颇具意义的结果，但是尚有以下问题须要进一步探讨与完善：一是，转染时所需病毒的剂量；二是，进行转染时所需要的时间；三是，经病毒转染后，树突状细胞的表面标志物的改变；四是，树突状细胞与T细胞共同孵育的最佳比例及时间；五是，被激活的T细胞其表面所分化抗原的改变。(编辑:)

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